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MHC 四聚体技术:检测抗原特异性T细胞的金标准

细胞在肿瘤、病毒、细菌、寄生虫、移植组织、过敏原、甚至自身抗原的适应性免疫应答中都发挥着重要的调节作用。大部分T淋巴细胞在其细胞表面表达单一的、高度特异性的抗原受体(TCR),与MHC-抗原肽复合物相结合并识别其中特异的抗原肽,启动获得性/特异性免疫应答机制,比如T细胞介导的细胞免疫和B细胞介导的体液免疫。

由于TCR MHC-抗原肽复合物之间的亲和力低,半衰期短,相互结合后容易快速脱落,重组的可溶性MHC-抗原肽复合物单体并不适合用于抗原特异性的T细胞检测。

1996年,美国斯坦福大学John D. Altman博士等人开发出 MHC-抗原肽复合物四聚体(简称:MHC四聚体)技术。该技术由4MHC-抗原肽单体分子及荧光染料组成的复合物,它以带有信号标记的链霉亲合素为基础,交联四个MHC分子单体,形成MHC四聚体;一个MHC四聚体分子可与同一T细胞表面的3-4TCR相识别并结合,从而大大增强了MHC-抗原肽复合物与TCR之间的结合力和检测特异性,并可通过流式细胞术成功实现对抗原特异性的T细胞的离体分析。

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如今,MHC四聚体技术已成为T细胞免疫应答定量的金标准。它极高的灵敏度和抗原特异性,适用于一些相关的基础研究和临床应用,包括:特异性 T 细胞高效分选;抗原表位短肽亲和力筛选;病毒逃避免疫机制研究;T细胞表面受体TCR亲和力研究;可作为分子标记,应用于T-Cell Receptor-Like Antibodies筛选研究;MHC免疫功能研究等。

MHC四聚体已广泛应用于疫苗研发;细胞治疗研究等。并具备诊断试剂开发潜能。

 

四聚体技术优势

与其他应用于T细胞检测的传统方法相比,如酶联免疫斑点检测(ELISPOT)、单细胞PCR等,MHC四聚体分析技术具有以下优势:

²  高灵敏度:可检测血液中低丰度(≤1%)的抗原特异性 T 细胞

²  高特异性:极大提高了TCRMHC-抗原多肽复合物结合的特异性

²  稳定性好:检测结果一致性好,可重复性高

²  多样化/个性化:可定制,合成特异的抗原多肽片段,组合成各种T细胞选择性 MHC四聚体

²  定性/定量分析:可结合流式细胞术实现对抗原特异性T细胞群的定性/定量分析

²  荧光标记选择灵活: 可选用PE或者APC标记

 





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